養(yǎng)細(xì)胞的都知道，細(xì)胞要寵要呵護(hù)還要擔(dān)驚受怕，最怕聽到污染二字。。。

特殊的節(jié)日，先感受一波有關(guān)細(xì)胞的土味情話～

通常來說，凡是混入培養(yǎng)環(huán)境中對細(xì)胞生存產(chǎn)生有害成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)該視為污染。

污染途徑

• 空氣：是微生物及塵埃顆粒傳播的主要途徑；

• 器材：培養(yǎng)器皿清洗、消毒不徹底，培養(yǎng)箱未進(jìn)行定期消毒；

• 操作：無菌觀念不強(qiáng)，技術(shù)不熟練，操作不規(guī)范導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染，使用污染的器皿等；

• 血清：使用已被支原體或病毒污染的血清；

• 組織樣本：原代培養(yǎng)的污染大多源自組織樣本。

常見微生物污染

根據(jù)污染源主要分為生物性污染、化學(xué)性污染和物理性污染。體外培養(yǎng)細(xì)胞最常見的是生物性污染，也就是我們常說的微生物污染，包括細(xì)菌污染、真菌污染、支原體污染等。

• 細(xì)菌污染：常見有大腸桿菌、假單胞菌、葡萄球菌等。污染后，隨著細(xì)菌的大量增殖產(chǎn)生大量酸性物質(zhì)，培養(yǎng)基短時間內(nèi)會從紅色變?yōu)辄S色，培養(yǎng)基變渾濁，相差顯微鏡下可見點(diǎn)狀細(xì)菌顆粒。（抗生素多用于預(yù)防細(xì)菌污染）；

• 真菌污染：包括霉菌污染和酵母污染，通常這類污染肉眼可見，大多數(shù)呈白色或淺黃色小點(diǎn)漂浮于培養(yǎng)液表面，鏡下觀察呈絲狀、管狀、樹枝狀的真菌交錯穿行于細(xì)胞之間。念珠菌和酵母菌呈卵圓形，散布生長在細(xì)胞周邊和細(xì)胞之間。短期內(nèi)培養(yǎng)基多不變渾濁；

• 支原體污染：支原體是一種大小介于細(xì)菌和病毒之間、能獨(dú)立生活的微生物，無細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，可通過過濾器。支原體可與細(xì)胞共存，污染后細(xì)胞無明顯變化，培養(yǎng)基通常不渾濁。支原體污染很難察覺，是最常見的干擾試驗(yàn)結(jié)果的一種污染。大多數(shù)的支原體污染來源于血清。

預(yù)防污染的方法

• 強(qiáng)化細(xì)胞培養(yǎng)的無菌意識（如消毒工作、穿戴實(shí)驗(yàn)服和口罩等）；

• 良好規(guī)范的操作；

• 注重培養(yǎng)過程（早預(yù)防、早發(fā)現(xiàn)、早處理）。

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