NanoTag Biotechnologies，2015年在哥廷根成立，專注于生產(chǎn)生化和熒光應用的單域抗體（納米抗體/VHH抗體）和試劑?？煞€(wěn)定提供熒光標記的單域抗體，新型標簽“ALFA”單域抗體及其純化系統(tǒng)，用于IP的Selector resins，以滿足各種實驗的要求。納米抗體特別適用于高分辨率顯微鏡成像。

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1、FluoTag —— 帶熒光標簽的單域抗體，每個單域抗體可偶聯(lián)1個，2個或4個熒光標簽，用于高分辨率顯微鏡成像。

COS 細胞線粒體表達標記物Tom70-mNeonGreen。使用FluoTag-X2 anti-mNeonGreen AbberiorSTAR RED (紫)對細胞進行染色，細胞核用 DAPI（藍）染色。

2、新型標簽 —— ALFA系統(tǒng)

ALFA 標簽是一種新型、合理設計的表位標簽 (SRLEEELRRRLTE)，它形成一個小而穩(wěn)定的α-螺旋，無論其在原核和真核宿主中的靶蛋白上的位置如何，該螺旋都具有功能。側(cè)翼脯氨酸殘基不是識別序列的一部分，但可能有助于標簽與目標蛋白質(zhì)的空間分離。

2.1 用于成像的ALFA系統(tǒng)：

Nanotag開發(fā)了一種以 ~26 pM 親和力結合 ALFA 標簽的單域抗體，它不僅非常適合超分辨率顯微鏡、免疫沉淀和蛋白質(zhì)印跡，而且還可以檢測活細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。這種納米抗體幾乎可以與所有種類的熒光團、酶或其他生物分子結合。

2.2 用于免疫沉淀的ALFA系統(tǒng)：

ALFA Selector ST:可在酸性或變性條件下洗脫，為高效下拉ALFA標記的目標蛋白而設計。

ALFA Selector PE:針對勝利條件下的洗脫進行優(yōu)化。

將在 PBS 中制備的 HeLa 裂解物與重組純化的 ALFA 標記的 GFP 底物（右泳道）混合。裂解物/底物混合物與 ALFA SelectorPE（左圖）或 ALFA SelectorST（右圖）一起孵育。用 PBS 洗滌后，結合的蛋白質(zhì)用 200 μM ALFA 肽、甘氨酸 pH2.2 或 SDS 樣品緩沖液 (SDS) 洗脫。使用 ALFA SelectorPE 時，天然條件下的肽洗脫是有效的。通過用甘氨酸或 SDS 樣品緩沖液洗脫，可以從兩種 ALFA Selector 樹脂中回收目標蛋白。