2016年1月7日，2016年達(dá)科為生物第四屆流式培訓(xùn)班—南京分站在南京醫(yī)科大學(xué)先知樓正式拉開帷幕。課程分為理論課與上機(jī)實(shí)驗(yàn)，1月7日到8日是理論課程，1月9日到10日是流式上機(jī)實(shí)驗(yàn)。

  1月7日上午，理論培訓(xùn)8點(diǎn)半準(zhǔn)時(shí)開始，由上海達(dá)科為公司總經(jīng)理薛金奎做開場(chǎng)發(fā)言， 16年的首場(chǎng)流式培訓(xùn)班選在南京醫(yī)科大學(xué)舉辦，大家的反響熱烈，給16年開了個(gè)好頭。并向各位學(xué)員介紹了達(dá)科為公司，以“引進(jìn)新產(chǎn)品、新技術(shù)”為己任，以“實(shí)驗(yàn)之友，服務(wù)質(zhì)優(yōu)”為服務(wù)宗旨，致力于為大家提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

    首先做報(bào)告是來(lái)自南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院侯亞義教授，高度評(píng)價(jià)我們達(dá)科為公司在流式實(shí)驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域的貢獻(xiàn)，并分享了侯教授課題組在系統(tǒng)性紅斑狼瘡方面的研究。紅斑狼瘡（SLE）在人群中的發(fā)生率女性大大高于男性，15-45歲多見。與SLE和APC-T cell信號(hào)傳導(dǎo)有關(guān)，涉及到幾乎所有免疫細(xì)胞，關(guān)鍵的信號(hào)通路是TLR7，在TLR7配體的刺激下，小鼠發(fā)生類SLE樣病變。SLE患者IFN-alpha增高，提示和pDC相關(guān)。TLR8和TLR9經(jīng)TLR7介導(dǎo)自身免疫疾病，TLR8和TLR9雙敲除鼠的脾臟增大，B細(xì)胞流式指標(biāo)CD21，CD23，CD5和B220都有降低。SLE嚴(yán)重的病人中幾乎找不到B細(xì)胞，并產(chǎn)生大量自身抗體、IgG增加以及IL-6等細(xì)胞因子分泌發(fā)生變化。DC的CD80，CD86和MHC發(fā)生變化，記憶性T、CD4和CD8 T cell增加。候教授還闡述了對(duì)SLE病因的觀點(diǎn)，不合適的炎癥反應(yīng)，引起免疫細(xì)胞的混亂而導(dǎo)致后期的免疫系統(tǒng)的不協(xié)調(diào)。

接下來(lái)是達(dá)科為儀器部梁鍇技術(shù)講解了細(xì)胞的精確計(jì)數(shù)，AO/PI雙熒光的原理和應(yīng)用。

    第三場(chǎng)報(bào)告由南京醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)系王曉明教授與大家分享了發(fā)生中心的免疫應(yīng)答和腸道上皮間淋巴細(xì)胞（IEL)的研究進(jìn)展。講解了流式的應(yīng)用，包括：表型分析、增殖、凋亡、抗原遞呈、磷酸化蛋白、以及細(xì)胞動(dòng)態(tài)分布，還對(duì)Gpr18調(diào)控小腸上皮間淋巴動(dòng)態(tài)平衡的課題思路進(jìn)行了深入的闡述。Gpr18在T、B淋巴細(xì)胞和IEL中高表達(dá)。Gpr18的敲除使得IEL在腸道上皮和固有細(xì)胞層中的穿梭平衡被打破，細(xì)胞遷移收到抑制，而影響免疫細(xì)胞的成熟。

1月7日下午，首先是江蘇省人民醫(yī)院血液科吳雨潔副研究員講解了大量流式細(xì)胞技術(shù)在血液病診斷中的應(yīng)用案例，尤其在淋巴細(xì)胞分群、白血病和淋巴瘤分型、微量殘留病灶的監(jiān)測(cè)中起到重要作用。以及TCRVbeta共有24種抗體，流式檢測(cè)對(duì)微小殘留病灶的診斷有重要意義（需求量很大）。

    接著是中國(guó)科學(xué)院巴斯德所張曉明研究員講解了復(fù)雜流式技術(shù)在腫瘤免疫中的應(yīng)用。目前科學(xué)界有基因組、蛋白組、轉(zhuǎn)錄組、表觀組、代謝組等概念，張教授提出細(xì)胞組學(xué)的概念，提出使用5-10ml的血液，既可以確定人的免疫狀態(tài)。用4-5個(gè)panel的組合，檢測(cè)70-80個(gè)指標(biāo)，對(duì)疾病進(jìn)行相關(guān)研究。張教授可以做到18色流式檢測(cè)，還分享了宮頸癌與Treg，乳腺癌和腫瘤浸潤(rùn)細(xì)胞及預(yù)后研究中的重要作用。

茶歇過(guò)后由南京醫(yī)科大學(xué)一附院肝移植中心呂凌教授為大家作報(bào)告。呂教授剛剛做完一臺(tái)手術(shù)，就趕來(lái)給大家分享他在Treg研究中的心得。呂教授研究Treg用于移植排斥，介紹了Treg的眾多marker，包括FoxP3，Helios，Nrp1，CTLA-4，CD45RA，CD39，PD-1/PDL-1等。講解了Treg的抑制免疫、介導(dǎo)細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)DC的抗原遞呈的功能。乙?；⒎核鼗?、microRNA對(duì)Treg的調(diào)節(jié)。肝臟移植排斥多為慢性排斥，對(duì)符合條件的肝移植病人，呂教授在體外成功誘導(dǎo)Treg后回輸病人，經(jīng)多次回輸（7個(gè)月時(shí)間），逐步減去免疫抑制劑的使用，成功使得肝移植擺脫免疫抑制劑的使用。

    1月8日上午九點(diǎn)，第二天的理論課程開始了。首先是達(dá)科為生物工程中心周翔經(jīng)理作報(bào)告。周翔經(jīng)理講述了ELISPOT的原理、刺激劑的選擇、斑點(diǎn)結(jié)果判定以及ELISPOT的應(yīng)用等。

接著是接著是南京醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)系陳曉軍博士講解了DC不同亞群流式技術(shù)的分析， MΦ的染色及包括MΦ中M1、M2的分型，以及B細(xì)胞染色。其中主要講解了Th1、Th17和Treg刺激阻斷劑的細(xì)節(jié)，包括選擇使用的刺激物、阻斷劑、阻斷時(shí)間等，其中尤其提到BioLegend抗體質(zhì)量非常好，還總結(jié)了2015年發(fā)表的免疫學(xué)相關(guān)文章。

    接下來(lái)由達(dá)科為免疫組技術(shù)王婷婷為大家講解了流式細(xì)胞術(shù)的工作原理和多色配色方案的解決，也講述了同型對(duì)照的選擇及儀器的設(shè)置和調(diào)節(jié)等。

    1月8日下午14點(diǎn)開始培訓(xùn)，首先是中科院生化細(xì)胞所劉小龍教授課題組陳旭峰博士作報(bào)告，陳博士講解了多色流式細(xì)胞術(shù)的原理、技術(shù)特點(diǎn)以及其優(yōu)缺點(diǎn)，并結(jié)合自己的實(shí)際案例給大家展示多色流式細(xì)胞術(shù)實(shí)際應(yīng)用中的基本流程。同時(shí)，陳博士還給大家介紹多色流式細(xì)胞術(shù)在造血干細(xì)胞的分析純化、磷酸化研究、周期凋亡研究以及移植等多個(gè)方面的實(shí)際應(yīng)用。最后，向大家闡述多色細(xì)胞術(shù)的一些注意事項(xiàng)。

 緊接著是上海市免疫學(xué)研究所沈蕾研究員闡述了當(dāng)處于肥胖時(shí)，細(xì)胞缺氧引起死亡而產(chǎn)生慢性炎癥，并闡述了T、B細(xì)胞對(duì)肥胖引起的炎癥的調(diào)控，以及T細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞的影響進(jìn)而影響胰島素分泌的變化和B細(xì)胞對(duì)糖代謝的影響。

  最后由達(dá)科為免疫組技術(shù)程華與大家分享了流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用，如胞內(nèi)因子檢測(cè)，細(xì)胞凋亡，細(xì)胞周期等技術(shù)內(nèi)容。

兩天充實(shí)而精彩的理論課程已圓滿結(jié)束，通過(guò)專家教授們的講解和分享，學(xué)員們表示收獲頗豐。接下來(lái)的9號(hào)到10號(hào)是為期兩天的流式上機(jī)操作，盡請(qǐng)期待。